根據免疫劑量該養多少雞

為了減少疫苗的浪費該養多少雞才合適?

dna疫苗(dnavaccine)，又稱“裸”dna疫苗(nakeddnavaccine)、基因疫苗(geneticvaccine)，亦有核酸疫苗(nucleicacidimmunizaiton)、多核苷酸疫苗(polynucleotidevaccine)等相關名稱，是近年來基因治療研究中所衍生並發展起來的一個新的研究領域。它是指將編碼某種蛋白質抗原的重組真核表達載體直接注射到動物體內，使外源基因在活體內表達，產生的抗原激活機體的免疫系統，從而誘導特異性的體液免疫和細胞免疫應答。該疫苗既具有減毒疫苗的優點。同時又無逆轉的危險，因此越來越受到人們的重視，被看作是繼傳統疫苗及基因工程亞單位疫苗之後的第三代疫苗[1]。
dna疫苗的研制是基因工程技術在疫苗研究中的另一重要突破。將一種抗原基因重組到真核表達載體，直接或經包裝注入體內表達出相應抗原，誘導機體產生免疫應答。這是極有發展潛力的一種新疫苗[2]。

dna疫苗；動物醫學
近年來，許多畜禽病毒性傳染病，已不能依靠傳統疫苗如滅活疫苗、弱毒疫苗等對其進行防治，dna疫苗的出現使得這一狀況得到改善。編碼病毒、細菌和寄生蟲等不同種類抗原基因的質粒dna，能夠引起脊椎動物如哺乳類、鳥類和魚類等多個物種產生強烈而持久的免疫反應。dna疫苗被稱為繼滅活疫苗和弱毒疫苗、亞單位疫苗之後的“第三代疫苗”，具有廣闊的發展前景。
1dna疫苗簡介
dna疫苗又稱核酸疫苗或基因疫苗，是編碼免疫原或與免疫原相關的真核表達質粒dna(有時也可是rna)，它可經一定途徑進入動物體內，被宿主細胞攝取後轉錄和翻譯表達出抗原蛋白，此抗原蛋白能刺激機體產生非特異性和特異性2種免疫應答反應，從而起到免疫保護作用。
dna疫苗具有許多優點：①dna接種載體(如質粒)的結構簡單，提純質粒dna的工藝簡便，因而生產成本較低，且適於大批量生產；②dna分子克隆比較容易，使得dna疫苗能根據需要隨時進行更新；③dna分子很穩定，可制成dna疫苗凍干苗，使用時在鹽溶液中可恢復原有活性，因而便於運輸和保存；④比傳統疫苗安全，雖然dna疫苗具有與弱毒疫苗相當的免疫原性，能激活細胞毒性t淋巴細胞而誘導細胞免疫，但由於dna序列編碼的僅是單一的一段病毒基因，基本沒有毒性逆轉的可能，因此不存在減毒疫苗毒力回升的危險(davis等，1999)，而且由於機體免疫系統中dna疫苗的抗原相關表位比較穩定，因此dna疫苗也不象弱毒疫苗或亞單位疫苗那樣，會出現表位丟失(donnelly等，1999)；⑤質粒本身可作為佐劑，因此使用dna疫苗不用加佐劑，既降低成本又方便使用(babiuk等，1999)；⑥將多種質粒dna簡單混合，就可將生化特性類似的抗原(如來源於相同病原菌的不同菌株)或1種病原體的多種不同抗原結合在一起，組成多價疫苗，從而使1種dna疫苗能夠誘導產生針對多個抗原表位的免疫保護作用，使dna疫苗生產的靈活性大大增加。
2dna疫苗的應用
2.1.1偽狂犬病病毒(prv)將編碼prvgc或gd基因的質粒dna免疫豬，能誘導保護性抗體的生成和細胞免疫的產生；將編碼gb、gc、gd的多種質粒dna混合使用，對引導免疫反應更有效(gerdtsv等，1997；rooijem等，1998)。
2.1.2豬流感病毒(hiv)mackling等(1998)的試驗結果表明，編碼hiv1株的血凝素(ha)和核衣殼蛋白(np)質粒dna用金顆粒包裹，以基因槍轟擊豬的表皮進行免疫後，ha質粒dna能使豬產生粘膜免疫反應而對流感病毒的攻擊具有抵抗力，dna疫苗引起的免疫反應與滅活疫苗相當。
2.1.3豬呼吸與繁殖綜合征病毒(prrs)prrs基因片段orf5編碼的主要囊膜糖蛋白gp5是該病毒的3個主要結構蛋白之一。含有orf5基因質粒dna能誘導豬抗gp5特異性中和抗體的產生；且免疫豬的外周血單核細胞在gp5重組蛋白存在時能夠發生轉化反應，顯示了gp5特異性細胞免疫的產生(pirzadehb等，1998)。meng(2000)將gp5基因克隆入巨細胞病毒(cmv)早期啟動子的控制之下構建成真核表達質粒而制備出dna疫苗，用其免疫仔豬後可誘導抗體的產生，實驗室攻毒後顯示出良好的保護效果。
2.1.4口蹄疫病毒(fmdv)將fmdv全長基因組的cdna克隆到質粒，並去除其編碼核衣殼蛋白vp1的細胞結合部位的dna序列，構建成質粒dna以肌肉或皮內注射，初次免疫後2～4周，可使所有的豬都產生特異的病毒中和抗體，攻毒試驗中呈現部分保護作用(wardg等，1997)。
2.1.5豬瘟病毒(csfv)余興龍等(2000)構建了csfv主要保護性抗原e2基因4種不同的真核表達質粒。小鼠免疫試驗結果表明，e2基因上不同的功能區對基因疫苗的免疫應答有很大影響，有信號肽序列的e2基因可誘導特異性的免疫反應，且無跨膜區序列的e2基因所誘導的免疫應答反應比有跨膜區序列的強，而無信號肽序列的e2基因所誘導的免疫應答反應比有跨膜區序列的強，而無信號肽序列的e2基因則不能誘導產生cfsv特異性的免疫反應。攻毒保護試驗結果表明，免疫家兔最少可抵抗10個最小感染劑量(mid)的豬瘟兔化弱毒苗(hciv)的攻擊；免疫豬可抵抗致死劑量的cfsv石門株強毒的攻擊。
2.2.1牛呼吸道合胞體病毒(brsv)用brsvg基因構建的dna疫苗，以無針方式免疫小牛時比皮內或肌肉注射引起的免疫反應強烈。
2.2.2牛疱疹病毒(bhv)用表達bhv1gd基因的質粒dna疫苗免疫牛，能產生很高的中和抗體；攻毒試驗後發現，免疫組比非免疫組的病毒排放量明顯減少(schrijverrs等，1997)。此疫苗通過肌肉或皮內注射均可引導免疫反應的產生。但皮內注射引起的免疫反應更強(孟松樹等，2000)。
2.2.3牛病毒性腹瀉病毒(bvdv)以表達bvdv1型主要糖蛋白e2的質粒dna肌肉注射小牛，可產生病毒中和抗體和抗原特異的細胞增殖反應；免疫後16周進行攻毒試驗，發現免疫牛能產生針對bvdv1型和2型的血清中和抗體強烈的記憶抗體反應，對牛有部分免疫保護作用(coxgj等，1993)。
2.3.1新城疫病毒(dnv)sakaguchi等(1996)將ndvf基因插入質粒載體，f基因的表達受巨細胞病毒早期增強子和雞β肌動蛋白啟動子控制。1周齡試驗雞肌肉內注射重組質粒後，有2/5注射線性質粒的雞和4/5注射線性質粒與脂質體轉染劑混合物的雞產生了高水平針對f蛋白的抗體，而注射閉環狀質粒的雞不能產生抗體。免疫9周後，體內有抗體的試驗雞都能抵抗致死劑量ndv強毒的攻擊。
2.3.2雞傳染性喉氣管炎病毒(ilt)將分別構建的含有雞傳染性喉氣管炎病毒王崗株gb、gc和gd基因的重組真核表達質粒及空載體質粒分組注射雛雞，攻毒後觀察免疫保護效果。結果表明，重組質粒誘導了免疫應答，免疫保護率達到79%，該基因疫苗可以作為預防ilv的1個補充。
2.3.3禽流感病毒robinson等(1993)最先將dna疫苗用於雞，以編碼禽流感病毒h7n7株血凝素(ha)基因的質粒(dna)由不同途徑(靜脈、腹腔、皮下注射)免疫3周齡雞，可對致死劑量的h7n7株病毒鼻內攻擊產生50%的保護。fyna等(1993)為了研究dna疫苗對雞最有效的免疫途徑，將100～200μg編碼h7ha的質粒dna通過靜脈、肌肉、皮下注射、點眼、囊內、滴鼻等方式免疫3周齡雞。4周後進行第2次免疫。第6周，用致死劑量的h7n7攻擊，免疫雞的存活率達10%～63%，而對照組的存活率只有2%。其中，多種途徑如靜脈和肌肉注射共同免疫的效果，比單一途徑如肌肉注射、點眼、法氏囊內、滴鼻免疫效果好。kodihalli等(1997)將編碼h5ha的質粒dna以0.25、0.5、1.5或10μg用基因槍免疫雞，4周後以100ld50的ty/lre/83株鼻內免疫進行攻擊，低至0.25μg劑量的dna可使50%的免疫雞存活。而1、5、10μg的劑量可完全抵抗致死劑量病毒的攻擊。dna疫苗對致死劑量的抗原變異株也可提供95%的保護，證實dna流感疫苗具有廣闊的發展前景。
國內研制的h7亞型血凝素基因dna疫苗，在極小的使用劑量下即可成功誘導免疫保護反應，並有效阻斷同源低致病力禽流感病毒在機體內的感染和排毒；研制的h5亞型血凝素dna疫苗，具有良好的免疫原性，肌肉注射途徑即可獲得對同源強毒攻擊的免疫保護，並能有效阻斷免疫保護存活雞機體的排毒。
3dna疫苗的安全性雖然人們對於使用dna疫苗的安全性存有疑慮，擔心dna可能會整合到宿主細胞的染色體上而造成插入突變，但眾多研究結果並未發現有插入突變的現象。質粒dna在動物體內會緩慢降解，不會造成動物的自體免疫(陳化蘭等，1998)，也不隨卵子和精子傳入子代體內，它隨生物鏈進入其他物種體內時也會失活，而且對環境的污染很小，因此其危險性遠低於現用疫苗。

風濕病學是一門年輕的臨床醫學學科，由於起步較晚，人們對風濕病的認識尚淺，易引起漏診、誤診。風濕病指主要侵犯關節、肌肉、骨骼及關節周圍的軟組織，如肌腱、韌帶、滑囊、筋膜等部位的疾病。常見的有自身免疫性結締組織病、系統性血管炎、骨與關節的病變，其常見的症狀有：
1.發熱是風濕病的常見症狀，可為低熱、中等度發熱、也可為高熱，往往可表現為不規則的發熱，一般無寒顫，抗生素無效，同時血沉快，如系統性紅斑狼瘡、成人斯帝爾病、急性嗜中性發熱性皮病、脂膜炎等均可以發熱為首發症狀。
2.疼痛是風濕病的主要症狀，也是導致功能障礙的重要原因。風濕病的疼痛中，起源於關節及其附屬結構的疼痛最為常見，然而肢體和軀干部位的疼痛也可見於內髒和神經系統病變。關節痛、頸肩痛、腰背痛、足跟痛往往是風濕病的主要表現，有時還伴有關節的腫脹。類風濕性關節炎常有對稱性的關節腫痛，手指關節、腕關節尤為明顯；強直性脊柱炎有腰背痛，休息時加重，可伴有足跟痛、紅眼；風濕性多肌痛有頸肩痛、肢帶肌的疼痛及肌無力。
3.皮膚黏膜症狀：系統性紅斑狼瘡、皮肌炎/多肌炎、白塞病、脂膜炎、干燥綜合症可有皮疹、光敏感、口腔潰瘍、外陰潰瘍、眼部症狀、網狀青紫、皮膚潰瘍等。
4.雷諾氏征:指（趾）端遇冷或情緒激動時出現發白，然後發紫、發紅或伴有指（趾）端的麻木、疼痛，嚴重的可有皮膚潰破，可見於硬皮病、類風濕性關節炎、混合性結締組織病、系統性紅斑狼瘡。
5.肌肉可有肌肉疼痛、肌無力，肌酶升高、肌電圖表現為肌原性損害等，如皮肌炎/多肌炎、混合性結締組織病、系統性紅斑狼瘡等。
6.系統損害：有些風濕病特別是自身免疫性結締組織病如系統性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎等可有多個器官的損害，如表現為心髒炎（心包炎、心肌炎、心內膜炎）、腎髒損害（蛋白尿、血尿、浮腫、高血壓、腎功能衰竭）、血液系統（白細胞減少、紅細胞減少、血小板減少、容血等）、呼吸系統（間質性肺炎、肺動脈高壓、胸腔積液）、消化系統（肝功能損害、黃疸）等。
7.常有自身抗體：抗核抗體、抗ds-dna抗體、抗ena抗體、抗血小板抗體、抗心磷脂抗體、類風濕因子等。

風濕病能否根治

在現代醫學概念中風濕病是風濕性疾病的簡稱，泛指影響骨、關節、肌肉及其周圍軟組織，如滑囊、肌腱、筋膜、血管、神經等一大組疾病。風濕性疾病包含彌漫性結締組織病（如類風濕關節炎、系統性紅斑狼瘡、干燥綜合症、炎性肌病、硬皮病、混合性結締組織病、白塞病等）、系統性血管炎、脊柱關節病（如強直性脊柱炎、反應性關節炎、

[1] [2] 下一页